本文檔為 Epithelix 3D 充分分化人上皮組織的現(xiàn)有用戶及新用戶提供指導(dǎo)。

1.組織的技術(shù)描述

以下是對(duì)我們組織的簡(jiǎn)要（非詳盡）技術(shù)說明：

Epithelix 公司生產(chǎn)源自人上皮上下呼吸道的 3D 體外重組組織（MucilAir™和 SmallAir™），具有以下特性：

•由低傳代（P1 代）的原代人細(xì)胞構(gòu)成。

•每種組織均在標(biāo)準(zhǔn) 24 孔板格式的 Transwell 插入式培養(yǎng)皿中，于氣液界面（ALI）條件下培養(yǎng)。每個(gè)插入式培養(yǎng)皿置于 24 孔板的孔中。

圖 1：24 孔板及 24 孔格式插入式培養(yǎng)皿

為 MucilAir™和 SmallAir™分別設(shè)計(jì)了專用培養(yǎng)基，以最大限度延長(zhǎng)組織的保存期。訂購(gòu)時(shí)請(qǐng)勿忘記同時(shí)訂購(gòu)培養(yǎng)基！

•MucilAir™可提供鼻、氣管或支氣管來源的版本，訂購(gòu)時(shí)請(qǐng)注明。

•MucilAir-Pool™僅提供鼻來源版本（由 14 位不同供體的細(xì)胞混合而成）。

•SmallAir™由細(xì)支氣管區(qū)域的細(xì)胞重組而成。

•所有產(chǎn)品均提供與成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)的版本（HF 版本），請(qǐng)咨詢庫(kù)存情況。

我們的模型可模擬體內(nèi)組織的特征：

•細(xì)胞類型完整：MucilAir™包含基底細(xì)胞、纖毛細(xì)胞和杯狀細(xì)胞；SmallAir™包含基底細(xì)胞、纖毛細(xì)胞和克拉拉細(xì)胞。

•纖毛可功能性擺動(dòng)，具備黏膜纖毛清除功能。

•可產(chǎn)生黏液。

•存在緊密連接。

•具備主動(dòng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)功能。

•具備代謝活性 / 解毒活性（CYP450 酶系）。

•可釋放可溶性因子（細(xì)胞因子、趨化因子、金屬蛋白酶等）。

•可維持分化狀態(tài)及功能長(zhǎng)達(dá)一年。

• 批次間重復(fù)性優(yōu)異。

•即開即用。

2.訂購(gòu)流程

本部分概述組織訂購(gòu)流程、常見問題及需注意的時(shí)間節(jié)點(diǎn)。

庫(kù)存與可獲得性

我們每周都會(huì)重組生產(chǎn)需求最高的產(chǎn)品：支氣管和鼻來源的 MucilAir™，以及鼻來源的 MucilAir-Pool™。這些產(chǎn)品通常可隨時(shí)供應(yīng)，但無論何種情況，均請(qǐng)先咨詢庫(kù)存！

部分產(chǎn)品需按需定制（例如：SmallAir™-CF 或 MucilAir-CF™）：重組生產(chǎn)過程至少需要 6 周時(shí)間，之后方可發(fā)貨。

大額訂單也需提前預(yù)訂。

訂購(gòu)步驟

1.請(qǐng)聯(lián)系上海起發(fā)說明您的需求、咨詢報(bào)價(jià)或庫(kù)存情況。

2.我們將向您發(fā)送正式報(bào)價(jià)及交貨時(shí)間表。

3.請(qǐng)?zhí)峁┌瑴?zhǔn)確交貨地址和開票地址的正式采購(gòu)訂單（PO），相關(guān)信息將用于后續(xù)流程。

運(yùn)輸信息

•組織在營(yíng)養(yǎng)凝膠中，置于標(biāo)準(zhǔn) 24 孔板內(nèi)，包裝在帶有加熱塊的恒溫箱中發(fā)貨。

•強(qiáng)烈建議客戶在收到組織后，先將其培養(yǎng) 2-3 天，以便組織從運(yùn)輸過程中恢復(fù)。

3.接收與培養(yǎng)維護(hù)

收到組織后應(yīng)如何處理？

將組織接入培養(yǎng)（詳見附錄 1：MucilAir™與 SmallAir™接入培養(yǎng)流程）。

重要提示：收到組織后，需將其培養(yǎng) 2-3 天，以便組織從運(yùn)輸過程中恢復(fù)。

日常維護(hù)

•每周更換一次培養(yǎng)基（詳見附錄 2：培養(yǎng)基更換流程）。

•根據(jù)黏液產(chǎn)生情況，每 2-4 周進(jìn)行一次頂端沖洗（詳見附錄 3：頂端沖洗流程）。

•在任何暴露實(shí)驗(yàn)前，建議提前 3 天進(jìn)行頂端沖洗，以標(biāo)準(zhǔn)化重復(fù)樣本中的黏液量。

附錄 1：MucilAir™與 SmallAir™接入培養(yǎng)流程

操作步驟

收到產(chǎn)品后，請(qǐng)遵循以下步驟操作：

1.將培養(yǎng)板在 37°C（濕度 99%，CO?濃度 5%）的培養(yǎng)箱中預(yù)熱 1 小時(shí)。

注：此步驟非必需，但推薦執(zhí)行，以方便將培養(yǎng)孔從凝膠中取出。

2.在超凈工作臺(tái)中打開一個(gè)新的 24 孔板

3.向每個(gè)孔中加入 0.7mL 預(yù)熱至 37°C 的 MucilAir™專用培養(yǎng)基。

4.打開 MucilAir™的包裝蓋。

5. 從包裝盒中取出培養(yǎng)板。

6. 將培養(yǎng)板轉(zhuǎn)移至超凈工作臺(tái)中。

7.用鑷子將插入式培養(yǎng)皿從凝膠中取出，轉(zhuǎn)移至步驟 2 中準(zhǔn)備好的新培養(yǎng)板中。

8.將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)（37°C，濕度 100%，CO?濃度 5%）。

9. 每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基。

（步驟 2、3、4、5、6、7 配圖說明，原文略）

附錄 2：培養(yǎng)基更換流程

培養(yǎng)基需每 3 天更換一次，每孔加入 0.7mL 新鮮培養(yǎng)基。（或每 2 天更換一次，每孔加入 0.5mL）

操作步驟

1.將足量的 MucilAir™或 SmallAir™專用培養(yǎng)基預(yù)熱至 37°C。

2.從培養(yǎng)箱中取出培養(yǎng)板，在無菌超凈工作臺(tái)中打開培養(yǎng)板蓋。

3.用連接真空泵的移液管或巴斯德吸管吸出所有孔中的舊培養(yǎng)基。

4.向每個(gè)孔中加入 0.5mL 或 0.7mL 新鮮培養(yǎng)基。注意不要將培養(yǎng)基灑到插入式培養(yǎng)皿內(nèi)的組織上。

5.將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)（37°C，濕度 100%，CO?濃度 5%）。

附錄 3：頂端沖洗流程

操作步驟

1.向組織的頂端表面加入 200μL 預(yù)熱至 37°C 的培養(yǎng)基。注意：頂端沖洗的總時(shí)長(zhǎng)不得超過 30 分鐘。

將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)（37°C，濕度 99%，CO?濃度 5%）20 分鐘。

2.（可選步驟）若黏液不濃稠，用 P200 移液管吸取 100μL 頂端液體，來回吹吸 3 次，以將黏液從頂端表面分離。

注意：切勿損傷上皮組織。

3.小心吸出組織頂端表面的培養(yǎng)基。

注意：切勿損傷上皮組織。

（步驟 1、2（可選）、3 配圖說明，原文略）

更多產(chǎn)品信息，請(qǐng)聯(lián)系中國(guó)區(qū)域代理商：上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

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（注：本文內(nèi)容基于品牌公開資料及行業(yè)常規(guī)信息整理，具體以品牌信息文檔為準(zhǔn)。）