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淋巴細胞分離液

更新時間:2012-01-14      點擊次數:6311

淋巴細胞分離液

產品編號 包裝 價格
130010-L 60ml 86.00
130010-L1 120ml 125.00
130010-L2 200ml 190.00
產品簡介  
    淋巴細胞分離液是一種根據細胞密度差異,借助離心產生的重力加速度,進行細胞的分離純化的常用試劑。從外周血、骨髓、外周淋巴器官或各種組織分離出來的細胞是多種細胞的混合物,如要研究某種特定細胞的結構、功能或表面標志等特征,首先要分離純化細胞。根據細胞的大小、密度、表面荷電、吸附能力或表面抗原的差異可實現對目的細胞的分離、純化,常用的細胞分離與純化方法有密度梯度沉降法、細胞電泳、貼附、親和層析、花環形成、補體介導殺傷溶解以及流式細胞儀(FCM)和免疫磁珠分選等。密度梯度沉降法是根據細胞密度差異,借助細胞分離液和離心,進行細胞分離純化的常用方法之一。細胞分離液則是一類能產生一定程度的密度梯度,高密度時粘度不高,濃度不同時滲透壓變化不大,經洗滌去除后能用于體外培養,而對細胞沒有毒性。zui常用的細胞分離液有Ficoll和Percoll。Ficoll是蔗糖的多聚體,呈中性,吸水性強,平均分子量為400,000,當密度為1.2g/ml仍未超出正常生理性滲透壓,也不穿過生物膜。紅細胞、粒細胞比重大,離心后沉于管底;淋巴細胞和單核細胞的比重小于或等于分層液比重,離心后漂浮于分層液的液面上,也可有少部分細胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細胞,就可從外周血中分離到單個核細胞。  
    賽馳生物生產的淋巴細胞分離液(Lymphocytes Separation Medium)以Ficoll和泛影酸鈉為主原材料,配制成密度為1.077的,無菌溶液。該產品適用于人淋巴細胞和大多數哺乳動物細胞的分離純化,能除去紅細胞和死細胞碎片。
包裝清單  
    2-8℃避光保存。
使用說明

    1.在離心管中加入適量。
  2.取抗凝血(無溶血)與等量Hank’s液或平衡鹽溶液充分混勻,用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上,注意保持兩液面界面清晰,水平離心2000rpm×20分鐘。
  3.離心后,管內液體分為三層,上層為血漿和Hank’s液,下層主要為紅細胞和粒細胞。中層為,在中上層液面處有一白色云霧層狹窄帶,即為富含淋巴細胞和單核細胞的單個核細胞(PBMC)及血小板。
    4.吸去zui上層的血漿,收集血漿層和交界面的單個核細胞,盡量全部吸出PBMC,移入一新的離心管中;
    5.加入Hanks’液或無血清培養液,混勻后離心200×g 10分鐘,棄去上清液(低速離心有利于去除細胞懸液中留存的血小板)。
    6.再用同樣洗滌液洗滌細胞2次,每次離心500×g 10分鐘,以洗去殘留的。再用細胞培養液將細胞調配成適當濃度。通常,每毫升外周血可得1~2×106PBMC

產品編號
130010-L
130010-L1
130010-L2
60ml
120ml
200ml
說明書
1 份
保存條件
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